食用菌栽培灭菌法


所有微生物都会被物理、化学或药物手段杀死。众所周知,食用菌栽培材料、空气、水、器具上到处都有微生物。培养一种真菌时,培养基、器具或用具在使用前必须经过灭菌处理,否则培养物会被其他真菌破坏。或微生物感染而影响实际栽培。杀菌的方法有很多种,最常用的有以下几种。 1、干热灭菌。一般玻璃器皿、培养皿、吸管等都会对材料进行灭菌。用报纸包好,放入烤箱。逐渐升温至150-160保持2小时后,关闭电源。让其慢慢冷却。 (温度过快时玻璃易碎)。灭菌完成。 2、湿热杀菌。湿热灭菌是采用蒸汽灭菌。它不需要像干热灭菌那样高的温度,因为热灭菌会使微生物的蛋白质凝固。蛋白质的凝固与水分含量和温度有关。当含水量大时,凝固所需的温度低。反之,含水量少时,凝固所需的温度高。温热灭菌分为常压和高压。两种。 .常压法常压灭菌是用蒸汽锅(或普通锅)进行蒸煮的方法。温度达到100一般需要4-6小时,当温度不超过100时,根据杀菌量一般保持8-24小时。可以达到无菌效果。在没有高压灭菌设备或易碎介质高温灭菌时常采用这种方法。此外,常压灭菌还有间歇灭菌方式。这种方法比较麻烦,通常必须进行3 次。每次一小时,因为第一次蒸后营养细胞被杀死,但孢子还活着,所以蒸完后将培养基放入培养箱中24小时,等孢子发芽后再蒸一次。再过24小时后,对第二个样品进行第三次蒸煮,即可完成灭菌。 高压法此法采用高压蒸汽灭菌器进行灭菌。用蒸汽杀菌时,如果锅内压力升高,温度也会相应升高,例如压力为0.56公斤/平方厘米=0.55帕斯卡。温度为112.6;如果压力为1 kg/cm2=0.98 帕斯卡。温度可达120-121。通常理想的杀菌温度为120,20分钟即可达到目的。 115C 30 分钟即可。使用高压灭菌器要注意两点。一是加压前必须将锅内的冷气排尽,否则虽然压力会升高,但温度达不到要求。二是杀菌完成后,锅内压力要慢慢降低,否则容器内的液体会喷出来。棉塞也容易脱落,造成事倍功半。没有烤箱时,其他器具也可以加热消毒,消毒前要用纸包好。 3、火焰灭菌。接种针或其他金属器具的灭菌,可在酒精灯的火焰上直接烧成红热。此外,在接种过程中,试管或三角瓶口也经过火焰灭菌。 4.药物灭菌。所用药物种类繁多,仅举三个例子:70%酒精,用于冷却烧红的接种针,手术前手或器具表面消毒,浸泡载玻片和盖玻片等。布罗格胺,市售5%溶液,使用时稀释至1/10,000至1/1,000,用于工作环境和器具表面的消毒。 0.1%氯化汞溶液:用于材料表面杀菌、器具或实验后废弃培养物的处理。 福尔马林(40%醛溶液制成):用于空间熏蒸杀菌,加热或加入高锰酸钾排出甲醛气体,注意保持空间密闭,保持24小时5.紫外线杀菌,常用用于接种室的空气灭菌等。

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